Reacción en cadena de la polimerasa
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La Reacción en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en inglés, es una técnica (descrita en 1985, por Kary Mullis) de biología molecular, cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mínimo, en teoría, de una única copia de ese fragmento.
Esta técnica sirve para amplificar ADN. Tras la amplificación, resulta mucho más sencillo identificar con una muy alta probabilidad virus y/o bacterias causante de una enfermedad, identificar personas (cadáveres, criminales...) o hacer investigación científica sobre el ADN amplificado. Estos usos derivados de la amplificación han hecho que se convierta en una técnica muy extendida, con el consiguiente abaratamiento del equipo necesario para llevarla a cabo.
Esta técnica se fundamenta en la propiedad natural de las ADN polimerasas para replicar hebras de ADN, y usa ciclos de alta y baja temperatura para separar las hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase de replicación y, a continuación, dejar que vuelvan a unirse a polimerasas para que vuelvan a duplicarlas.
Técnica
Para que la técnica funcione se necesita, abundante suministro de de bases de nucleótidos y dos cebadores, que son secuencias cortas de unos veinte nucleótidos y que se usan para iniciar la reacción (PCR).En primer lugar, se calienta la mezcla para separar las hebras de ADN (el ADN se abre) y a continuación se enfría la solución, lo que permite que los cebadores se peguen a las partes adecuadas de la hebra de ADN (chocan unas a otras hasta que encuentan el complemento exacto, y entonces se ensamblan, actuando como límites de la región de la molécula que va a ser duplicada). Para terminar, se aumenta la temperatura hasta el valor en que puede actuar la polimerasa, y sobre la plantilla crece una hebra nueva complementaria
imagen:Esquema_de_PCR.jpg
Usos de la PCR
- Huella genética
- Test de Paternidad
- Diagnóstico de enfermedades hereditarias
- Clonación de genes
- Mutagénesis
- Análisis de ADN fósil
- Genotipo de mutaciones específicas